1. C18色譜柱的基本原理

　　C18色譜柱（ODS柱，Octadecylsilyl）是反相高效液相色譜（RP-HPLC）中的固定相，其分離原理基于疏水相互作用：

　　固定相：硅膠顆粒表面鍵合十八烷基（C18H37）長鏈，形成疏水層。

　　流動相：通常為水+有機溶劑（如甲醇、乙腈），極性較強。

　　分離機制：

　　非極性/弱極性化合物與C18鏈疏水作用強，保留時間長。

　　極性化合物與流動相親和力強，先被洗脫。

　　通過調節(jié)流動相比例（如梯度洗脫），可優(yōu)化分離效果。

　　2. C18色譜柱的主要作用

　　C18柱廣泛應用于：

　　藥物分析（如抗生素、維生素、中藥成分）

　　食品安全（農藥殘留、添加劑檢測）

　　環(huán)境監(jiān)測（多環(huán)芳烴、酚類污染物）

　　生物樣品（蛋白質、肽段、代謝物）

　　優(yōu)勢：

　　適用大多數有機化合物，尤其是非極性至中等極性物質。

　　穩(wěn)定性好，兼容多種流動相（pH 2-8）。

　　3. C18色譜柱的維護方法

　?。?）日常使用注意事項

　　避免高壓沖擊：

　　流速應逐步升高/降低，防止固定相塌陷。

　　過濾流動相和樣品：

　　使用0.45 μm（或0.22 μm）濾膜，防止顆粒堵塞。

　　控制pH范圍：

　　硅膠基質的C18柱適用pH 2-8，超出范圍會導致鍵合相水解。

　?。?）清洗與再生

　　常規(guī)清洗（每次運行后）：

　　用高比例有機相（如90%甲醇或乙腈）沖洗30分鐘，去除殘留強保留物質。

　　強污染處理：

　　脂類/蛋白質污染：用異丙醇或四氫呋喃（THF）反向沖洗。

　　無機鹽沉積：先用純水沖洗，再過渡到有機相。

　?。?）長期保存

　　儲存于純甲醇或乙腈中，避免水分滋生微生物。

　　密封柱頭，防止溶劑揮發(fā)導致固定相干涸。

　　4. 常見問題分析與解決

　　問題可能原因解決方案

　　柱壓升高篩板堵塞/固定相污染反向沖洗、超聲清洗篩板或更換

　　峰形拖尾柱效下降/樣品溶劑不匹配用甲醇活化柱子，優(yōu)化樣品溶劑（盡量與流動相近似）

　　保留時間漂移流動相比例變化/柱溫波動檢查泵比例閥、穩(wěn)定柱溫

　　基線噪音大流動相不均勻/檢測器污染脫氣流動相、清洗檢測器流通池

　　5. 壽命延長技巧

　　使用保護柱：攔截強保留雜質，延長分析柱壽命。

　　避免高溫：超過60℃可能加速鍵合相降解。

　　定期測試柱效：用標準品（如萘、甲苯）測定理論塔板數（N值），若下降>20%需維護或更換。

　　總結

　　C18色譜柱是HPLC的核心部件，其分離效果依賴于疏水作用，需通過合理維護（如過濾樣品、控制pH、定期清洗）來保證性能。遇到問題時，可通過壓力、峰形、保留時間等指標快速診斷并解決。